| 成果名称： | 线粒体肌病和线粒体脑肌病的临床和发病机理研究 |
| 鉴定编号： | 2003061 |
| 完成单位： | 空军总医院 |
| 所属领域： | 药物生物 |
| 成果摘要： |
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线粒体肌病和线粒体脑肌病的临床和发病机理研究属神经病学。适用于研究线粒体肌病和脑肌病的临床特点、演变及发病机制。主要技术 结合5年以上随访、病理和理化资料，归纳本病诊断要点及演变；采用PGA法检测肌肉线粒体内各种酶复合体的活性变化；观察、比较GT及其它常用染色的RRF改变；筛选观察肌肉超微结构更加清晰的固定液；用图像分析方法测量NMJ的线粒体和突触前、后膜的变化；应用PCR扩增和限制性内切酶法判断患者肌肉mtDNA突变点。创新点 总结出本病临床特点，指出在其发展过程中可转变类型，有必要随访；证实了线粒体内与复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ结合的胶体金颗粒均减少,其程度与疾病类型有关；提出HE等染色见到的RRF样纤维也可作为确诊的依据；筛选出PLP液固定肌组织,NMJ结构显示更清晰；证实了患者NMJ神经末端内线粒体形态改变,而突触前、后膜无变化；检测出MELAS和MERRF患者分别存在nt8344和nt3243点突变,其中一例MERRF同时有这两点突变，这可能与患者临床表现多样化和类型转变有关。社会效益 发表论文9篇（国外1篇、中华英文杂志1篇、中华系列杂志4篇、其它源期刊3篇）和一部书的章节。被MEDLINE库二次纳入和美国医学信息会搜索引擎收录，中华医学杂志（1997）和中华神经科杂志（1996）收入当年神经病学进展，为国内外刊物和多家医院应用。 |
| 鉴定意见： |
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线粒体肌病和线粒体脑肌病患者临床症状重叠、多变，长期以来困扰着临床诊断、治疗及其对预后的估计，发病机制也不十分清楚。本项目围绕其临床特点和病程演变过程及发病机制进行了研究，创新点如下： 1．通过对23名患者5年以上的随访及其肌肉组织的病理、理化检查，归纳了线粒体肌病和脑肌病的临床特点，发现在疾病发展过程中其临床类型有可能发生转变。 2．采用PGA标记法检测肌肉线粒体内各种酶复合体的活性表现，观察到患者肌肉线粒体内与复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ结合的胶体金颗粒均减少,其程度与疾病的类型有关。 3．观察、比较了GT和其它常用组化染色下的RRF特征，提出除GT外HE等染色中能显示出RRF样纤维,也可作为诊断依据。 4．筛选了观察肌肉组织超微结构的固定液，提出PLP固定液对NMJ超微结构显示得更为清晰。 5．应用图像分析软件，观察并测量了NMJ的神经末端内线粒体和突触前、后膜的变化，看到了患者NMJ神经末端内线粒体的形态有改变,而突触前、后膜无变化。 6．采用PCR扩增和限制性内切酶法对5例线粒体脑肌病患者进行了肌肉线粒体DNA突变点检测，发现3例MELAS型患者中有1例存在着nt8344点突变；2例MERRF型患者存在着nt3243点突变，其中的1例同时还存在着nt8344的突变。 該该研究对线粒体肌病和脑肌病的诊断及病程演变提供了客观依据，为其发病机制的研究提供了新思路。课题设计合理，技术难度较大、方法先进、数据准确、结论可信。研究工作在国内属率先开展，该成果达国内领先水平。 建议进一步从分子水平检测线粒体的相关基因变化，更加深入地研究本病的发病机制。 |
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